PCR装置使用上の注意

いつ PCR装置 微小感染因子を検出すると、汚染によりさまざまな問題が発生しやすくなります。したがって、PCR 装置を操作する場合、オペレーターは PCR 汚染の可能性を最小限に抑えるか、汚染やその他の問題の発生を排除するために、いくつかの操作手順に厳密に従う必要があります。ここではPCR装置の使用方法と注意点について説明します。

コンテンツリストは次のとおりです。

l PCR 装置の操作手順。

l PCR装置の使用に関する注意事項。

l PCR 機器のケアとメンテナンスの方法。

PCR 装置の操作手順。

1. プライマー: の特異性を決定します。 PCR装置 増幅。 DNA検査に応じて異なるプライマーが使用され、各病原微生物は独自の特異的なプライマーを持っています。

2. 耐熱性DNAポリメラーゼ：耐熱性細菌から分離された酵素で、90℃～100℃の高温にも耐えます。

3. 10×PCRマシンバッファー: 500mmol/l KCl; 100mmol/L トリス-HCl (pH8.4、20℃) 150mmol/L MgCl2、1mg/ml ゼラチン。 10×PCRバッファーを酵素と一緒に購入しました。

4.5 mmol/L dNTP PCR 装置原液：dATP、dCTP、dGTP、dTTP ナトリウム塩を各 100 mg 加え、滅菌脱イオン水を加えて溶解し、NaOH で pH 中性に調整し、300 μl ずつ分注し、-20℃ で保存します。 dNTP 濃度は UV 吸収法により測定されます。現在入手可能な dNTP ソリューションは製品化されています。

5. DNA テンプレート: 検査対象の標本を処理溶液で処理します。処理や操作はさまざまですが、目的は、PCR 装置の標本で検査される DNA を露出させることです。

PCR 装置の使用に関する注意事項。

1. PCR 装置は、外部電源システムの電圧が一致する水平で頑丈なプラットフォームに設置する必要があり、適切な接地線が必要です。

2. 周囲温度は約23℃、湿度は約60％に保たれます。

3. PCR マシンには、電力 ≥ 3000W の電圧レギュレーターが装備されている必要があります。

4. 定期的に掃除し、メンテナンスする必要があります。

5. PCR 装置を使用する場合は、上記の使用手順を厳守してください。

PCR 機器のケアとメンテナンスの方法。

1. キュベットの洗浄 まずキュベットの蓋を開けます。 PCR装置次に、キュベットを 95% エタノールまたは 10% 洗浄液に 5 分間浸し、汚染されたウェルを洗浄します。マイクロピペットで液体を吸引し、綿棒を使用して残りの液体を吸収します。 PCR 装置の電源を入れ、温度を 50℃ に維持するように PCR プログラムを設定して実行し、残留液体を蒸発させて除去します。通常は 5 ～ 10 分で十分です。

2. 蛍光定量 PCR 装置のホット カバーの洗浄。蛍光汚染があり、この汚染がキュベットからのものではない場合、または汚染や残留物が PCR 装置のホット カバーに影響を与える場合は、圧縮空気または純水を使用してパッド カバーの底を洗浄し、キュベットの穴がきれいで、汚れが光路を妨げていないことを確認する必要があります。

3. PCR 機器の外面のクリーニング 機器の外面をクリーニングすると、ほこりや油分は除去できますが、消毒の効果まではいきません。 PCR 装置の外面を洗浄するには、非腐食性の洗浄剤を選択してください。

4. ヒューズを交換します。まず PCR マシンの電源を切り、プラグを抜き、電源ジャックの横にあるヒューズ ボックスを開け、予備のヒューズと交換し、正常に戻るかどうかを確認します。

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