数ブラウズ:233 著者:バイオテケ株式会社 公開された: 2021-02-18 起源:Bioteke
液体の組成により、不活化されたものと非不活化されたものの2種類に大別されます。このうち、不活化ウイルス保存液にはトリス、グアニジン塩、EDTAなどが含まれており、その主な目的は細胞やウイルスのタンパク質コートを破壊して核酸を遊離させることで、その後のリアルタイム蛍光RT-PCRで核酸検出を行い、サンプルにウイルス配列が含まれているかどうかを判定できるようにすることである。
不活化された保存液はウイルスの構造を効果的に溶解し、感染能力を失う可能性があります。検査員にとってより安全であり、真菌や細菌の繁殖を効果的に抑制できます。ただし、グアニジン塩を添加するため、核酸溶液中に塩イオンが残る場合があります。濃度が高すぎる場合、および下流の検査キットのポリメラーゼ活性が塩イオン濃度に非常に敏感である場合、検査の Ct 値が遅れるか、場合によっては偽陰性が発生することがあります。
非不活化保存液には、一般的にUTMタイプとVTMタイプが含まれます。非不活化ウイルス保存液の成分は主にハンクス液をベースとしています。ハンクス液をベースに、ゲンタマイシン、真菌抗生物質、BSA(ウシ血清アルブミンの5番目の成分)、生物学的緩衝液HEPES、アミノ酸、凍結保護剤、グリセリンなどのさまざまな緩衝液も添加し、ウイルスの完全性と生物学的活性を維持するために使用されます。非不活化保存液はウイルスの完全性をより良く保存するため、検出率は高くなりますが、検出前にウォーターバス不活化処理が必要です。
ユーザーは、自身の使用シナリオに応じて、保存ソリューションの種類を合理的に選択できます。
2、サンプル保存後の検出感度はどれくらいですか?
さまざまなタイプの保存チューブの選択を容易にするために、さまざまなブランドを 4℃ の保存条件およびさまざまな保存日数でテストしました。新型コロナウイルスの核酸検出の感度は以下の通りです。
4℃で14日間保存した後の、異なるブランドのUTMの保存効果の比較
保存管の種類を選択しやすくするために、銘柄、室温保存条件、保存日数(1日目、3日目、7日目)を変えて新型コロナウイルスの核酸検出感度を試験しました。結果は以下の通り。
室温で 7 日間保管した後の、さまざまなブランドの ITM の保管効果の比較
室温で 7 日間保管した後の、さまざまなブランドの VTM の保管効果の比較
室温で 7 日間保管した後の、さまざまなブランドの UTM の保管効果の比較
一般に、Bioteke の Ct 値は、室温または 4℃ の保管条件に関係なく、市販されている一部の一般的なブランドの Ct 値よりも低くなります。検出感度が高く、検査結果がより安定しています。
3、 不活化保存液(ITM)の効果は何ですか?
さまざまな不活化時間 (0、1、2、5、10、20、40 分) でのプラークの数
ウイルス | ウイルス力価 | 不活性化の時間 | プラークの数 | 許容性 y | ||
HSV-1 | 1×10^5 PFU/mL | 0 | 48 | 55 | 51 | / |
1分 | 0 | 0 | 0 | 承認されました | ||
2分 | 0 | 0 | 0 | 承認されました | ||
5分 | 0 | 0 | 0 | 承認されました | ||
10分 | 0 | 0 | 0 | 承認されました | ||
20分 | 0 | 0 | 0 | 承認されました | ||
40分 | 0 | 0 | 0 | 承認されました | ||
さまざまな不活化時間 (0、1、5、40 分) でのプラークの図 (プラークは赤いボックス内に示されています)
結論:
Bioteke 製品は、輸送媒体(ITM)を不活化し、HSV 1 ウイルスを効果的に不活化します。
4、Bioteke ウイルス保存ソリューションの特徴
a) UTM、VTM、ITM などの複数のタイプの保存ソリューションを提供します。
b) Bioteke スワブと併用して、複数のニーズを満たすことができます。
c) サンプルの初期コピー量を確保するために、Bioteke 核酸抽出キットと一致する選択された原材料。
5. Bioteke がウイルス保存ソリューションに関して取得した検査報告書
規格 | 試験ユニット |
ISO EN11137-1:2015 EN11137-2:2013 ISO EN11137-3:2017 | 呉江大盛試験技術有限公司 |
ISO11737-1:2018 | SGS |
リーチ | SGS |
ISO10993 | SGS |
添付ファイル: 本番環境
参考文献
【1】《新型冠状肺炎臨床検査技術ガイド(第3版)》、中国疾病管理予防センター。
【2】《2019年新型コロナウイルス(2019-nCoV)の調査中の患者(PUI)からの臨床検体の収集、取り扱い、検査に関する暫定ガイドライン》。
【 3 】 A Stephen K Hashmi、Miriam Bührle、Michael Wöl fle、他
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【4】 Daley P、Castriciano S、Chernesky M、Smieja M。非感染ボランティアおよび症状のある患者から呼吸上皮細胞を収集するための植毛綿棒とレーヨン綿棒の比較。 J Clin Microbiol、2006;44(6):2265-2267。土井:10.1128/JCM.02055-05。
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【6】劉延斌、劉濤、崔岳、王波、羅鳳明。新型コロナウイルス肺炎の核酸スクリーニングにおける鼻腔ぬぐい液と咽頭ぬぐい液の2つのサンプリング方法の比較[J]。中国呼吸器および救命救急ジャーナル、2020、02:141-143。